電話：13601437756

---

掃一掃 加我微信

近年來，猴痘、新型冠狀病毒等傳染病的全球流行凸顯了公共衛生應急體系中早期篩查的關鍵作用。傳染病的快速傳播依賴于隱匿感染期的病毒擴散，而早期精準檢出是切斷傳播鏈、降低防控成本的核心環節。傳統檢測方法如膠體金層析、常規PCR存在靈敏度不足、檢測周期長或操作復雜等局限，難以滿足疫情防控中“早發現、早隔離、早處置”的要求。

熒光定量PCR技術憑借實時監測核酸擴增過程的優勢，實現了病原體的精準定量與快速檢測，已成為傳染病診斷的金標準。博清生物科技（南京）有限公司針對公共衛生場景需求研發的熒光定量PCR儀，融合了快速溫控、高靈敏度檢測及便攜設計等特性，適配移動實驗室、基層醫療機構及現場應急檢測等多元場景。

一、材料與方法

（一）儀器與試劑

1、檢測儀器：博清生物熒光定量PCR儀；對照儀器為某產品實時熒光定量PCR儀。

2、試劑耗材：病毒/細菌核酸提取試劑盒，SYBR Green I熒光染料，特異性引物探針，標準質粒。

（二）檢測對象

標準品：金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌標準菌株（ATCC），猴痘病毒、HBV、HPV標準質粒（濃度10?拷貝/μl）。

（三）實驗方法

1、核酸提取

參照試劑盒說明書處理樣本，病毒樣本采用硅膠膜吸附法提取RNA，逆轉錄為cDNA；細菌樣本采用蛋白酶K消化-乙醇沉淀法提取DNA，經驗證核酸純度后備用。

2、PCR 反應體系與條件

反應體系20μl：含10μl 2×PCR SuperMix，上下游引物各0.5μl（終濃度 0.2μmol/L），探針0.3μl（終濃度0.15μmol/L），模板核酸2μl，無核酸酶水補至體積。反應條件：95℃預變性5分鐘；95℃變性15秒，60℃退火延伸1分鐘，40個循環，退火階段同步采集熒光信號。

3、性能評估指標

靈敏度：對標準品進行10倍梯度稀釋（101-10?拷貝/μl），檢測最低檢出限；

特異性：交叉檢測非目標病原體（真菌、支原體、無關病毒），驗證無交叉反應；

時效性：記錄單輪檢測全程耗時，評估批量樣本處理效率；

現場適用性：在移動實驗室環境下（溫度15-35℃），對模擬疫情樣本進行快速篩查，統計陽性檢出率。

二、結果

（一）檢測靈敏度與特異性

博清生物熒光定量PCR儀對細菌類病原體（金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌）的最低檢出限為103拷貝/μl，血液樣本中細菌污染檢出限達10?CFU/ml，與文獻報道的熒光定量PCR技術最優水平一致；對病毒類病原體（猴痘病毒、HBV、HPV）的檢測下限為20IU/mL，低病毒載量樣本（<50IU/mL）陽性檢出率達85%，顯著高于傳統RT-PCR（70%）（P<0.05）。特異性檢測顯示，儀器僅對目標病原體產生特異性熒光信號，與真菌、支原體及無關病毒無交叉反應，特異性達98.6%。

（二）檢測時效性

該儀器憑借≥5.0℃/s的快速升降溫性能，單輪檢測全程耗時45-55分鐘，較傳統熒光定量PCR儀（60-90分鐘）縮短25%-30%。多通量設計支持批量樣本并行處理，每小時可完成多份樣本檢測，滿足大規模篩查需求。

（三）現場應用效果

在模擬疫情現場應急篩查中，移動實驗室搭載博清生物熒光定量PCR儀對100份疑似樣本進行檢測，全程耗時短，陽性檢出率為23%，與后續實驗室確診結果一致性達97.8%。儀器輕巧便攜的設計適配基層醫療機構及口岸檢疫場景，無需專業實驗室環境即可開展檢測，操作流程經簡單培訓即可掌握。

三、討論

傳染病早期篩查的核心需求是“快速、精準、可及”，這三大要素直接決定疫情防控的響應效率與控制效果。博清生物熒光定量PCR儀通過技術優化，全面契合公共衛生防控的實際需求，其應用價值主要體現在以下方面：

（一）技術性能適配早期篩查需求

高靈敏度是早期檢出隱匿性感染的關鍵。該儀器采用高靈敏度傳感器及長壽命LED光源，結合4色獨立熒光通道設計，實現了對低拷貝病原體的精準捕獲，檢測限達到103拷貝/μl的行業先進水平。在HBV、HPV等傳染病檢測中，其對低病毒載量樣本的高檢出率，能有效避免傳統方法的漏診問題，為感染者早期干預提供可能。快速升降溫技術（≥5.0℃/s）將單輪檢測時間壓縮至1小時內，解決了傳統PCR檢測耗時過長導致的防控滯后問題，尤其適用于疫情暴發時的大規模快速分流篩查。

（二）場景適配性提升公共衛生服務覆蓋面

公共衛生防控不僅需要核心實驗室的精準檢測，更需要基層醫療機構、口岸檢疫、移動篩查車等多元場景的快速響應能力。博清生物熒光定量PCR儀的輕巧便攜設計（無需連接PC即可獨立運行）、10寸直觀觸控界面，以及寬溫域適應能力，使其能脫離專業實驗室環境開展工作。在猴痘疫情防控中，類似的便攜PCR設備已被證實能有效提升多部位樣本檢測的時效性，為接觸者分級管理提供快速依據。這種場景適配性大幅拓展了熒光定量PCR技術的應用邊界，使優質檢測資源下沉至基層，助力構建“早發現、早報告、早處置”的防控網絡。

（三）成本效益優化公共衛生資源配置

相較于傳統大型PCR儀，博清生物熒光定量PCR儀在保證檢測性能的同時，具備更高的成本效益優勢。16通量設計平衡了檢測效率與設備投入，免維護LED光源降低了后期運營成本，適合資源有限的基層醫療機構批量配置。在HPV高危人群篩查等公共衛生項目中，熒光定量PCR技術已被證實能顯著提升篩查準確性，降低宮頸癌發病風險，而博清生物儀器的高性價比特性，為這類普惠性篩查項目的規模化推廣提供了可能。

本研究存在一定局限性：檢測的病原體種類仍需擴展，臨床樣本量可進一步擴大以驗證不同地區、不同人群的適用性；未來可探索該儀器與核酸提取自動化設備的聯用，進一步提升檢測效率。

博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光定量PCR儀憑借高靈敏度、強特異性、快速檢測及便攜易用的綜合性能，在傳染病早期篩查中展現出顯著優勢。其不僅能精準捕獲低拷貝病原體，滿足隱匿性感染與早期感染的檢測需求，還能適配多元公共衛生場景，推動檢測資源下沉，為疫情防控的快速響應與精準施策提供關鍵技術支撐。該儀器在病毒與細菌類傳染病篩查中的穩定表現，使其具備成為公共衛生應急體系核心檢測設備的潛力，值得在基層醫療機構、口岸檢疫、疫情應急響應等場景中推廣應用。